CRISPR/Cas9 基因编辑
 
CRIPSR/Cas9 基因编辑是一种简单而强大的新技术。它可用于敲除特定的基因、纠正错误编码的基因和修饰己知的基因功能。“CRISPR”指基因组信息的Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats。在一些细菌中,当它与Cas9蛋白酶结合后,是细菌抵抗病毒的一种分子机制。因此,CAS9是CRISPR相关的核酸酶,它是一把分子剪刀,用于切割DNA。这种切割过程需要特异性的导引RNA(gdRNA),由crRNA和tracrRNA组成, 简称为单一引导RNA(sgRNA)。当分子剪在DNA的特定区切割后,细胞自身具有自然修复的分子机器,可以修复切割的区段。这一过既可敲除目的基因,又可以去除疾病基因,还可加入合适的DNA模板,用于修复疾病基因。
  
利用CRISPR/Cas9技术,本公司为客户提供基因敲除、敲入服务:
  
东岭Cas9相关产品:
1. 多种工具基因及全基因组的sgRNA库可直接选择:
 
免疫检验点
通用型CART靶分子
文库
靶标分子
(Human/Mouse )
PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIGIT, TIM-3, LAG-3
TCR, β2M
全基因组sgRNA文库
3-5 个sgRNA/gene
2. 提供上述文库的慢病毒包装服务;
3. 提供定制Cas9蛋白稳转细胞株服务,筛选sgRNA更方便。
 
东岭案例:
    利用本公司构建的Cas9敲除TCR-β慢病毒产品感染人T淋巴细胞,流式检测T细胞表面CD3/TCR-β,结果显示40%左右T细胞呈TCR-β链阴性。
 
 
 
CRIPSR病毒质量标准:
检测项且
检测方法
质控标准
细菌
培养法
阴性
真菌
培养法
阴性
支原体
PCR定量
阴性
内毒素
LAL
<5.0 EU/ml
细胞活力
Trypan Blue Staining
>90% 活细胞
细胞系基因敲除
流式细胞仪测定或WB测定
>100% 细胞
造血干细胞
流式细胞仪测定或WB测定
20% 到 90%
免疫细胞
流式细胞仪测定或WB测定
20% 到 90%
 
产品栏目及价格
产品
特征
生产时间(工作日)
价格(元)
细胞系基因敲除
敲除目的基因(为客户定制)
45
询问
造血干细胞
敲除目的基因(为客户定制)
45
询问
免疫细胞
敲除目的基因(为客户定制)
45
询问
CART细胞
敲除目的基因(为客户定制)
45
询问