基因组DNA快速提取试剂盒（非过柱型）
Fast Genomic DNA Extraction Kit （Column-free）
产品介绍：
本试剂盒包含了快速制备基因组DNA和后续PCR扩增的所有试剂，适用于从细胞/组织中一步提取基因组DNA并用于后续的PCR扩增和检测。整个提取过程无需去除蛋白、RNA及其它次生代谢物，无需有机溶剂抽提，无需无水乙醇沉淀、无需过柱纯化，操作简便、快捷，质量稳定且灵敏度高，低至5千个细胞即可进行检测。
本试剂盒提供的2x PCR Master Mix是一种扩增兼容性很强的PCR试剂，无需彻底去除蛋白等杂质，便能进行高效特异扩增，该试剂包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液等。具有快速简便、特异性强、稳定性好等特点。特别适合批量样本的基因组检测。
产品信息：
产品组分 | 规格 | 储存条件 |
Solution1 | 3×1.8ml | 常温 |
Solution2 | 3×1.8ml | 常温 |
Nuclease-Free Water | 1ml | -20℃ |
2x PCR Master Mix | 1ml | -20℃ |
使用说明：
请详细阅读使用说明后再开始相关实验。
1.处理材料
细胞：贴壁培养的细胞应先提前处理为细胞悬液，取一定量细胞（细胞量请参考附表1）置于EP管中，离心，去除上清后备用；
组织：动物组织，1-5mg；
鼠尾剪1-2mm，置于EP管中即可。
2.添加50μl Solution 1，确保细胞或组织完全浸没，95℃孵育半小时；
3.孵育结束后，添加50μl Solution 2，充分震荡，混合均匀后，离心（12000g，10min，4℃），将上清转移到新的EP管中（勿吸到管底沉淀），作为模板直接用于PCR扩增或-20℃贮存备用；
4.PCR扩增反应。
PCR反应体系如下（20μL）:
组分 | 上样体积（μl） |
2×PCR Master Mix | 10 |
Primer-F（10μM） | 1 |
Primer-R（10μM） | 1 |
模板DNA | 参考附表1 |
Nuclease-Free Water | 补至20μl |
参考反应条件:
步骤 | 温度 | 反应时间 | 循环数 |
Step 1 | 95℃ | 2min | 1 |
Step 2 | 95℃ | 30s | 35 |
58℃ | 30s | ||
72℃ | 1min | ||
Step 3 | 72℃ | 5min | 1 |
Hold | 12℃ | ∞ |
5.PCR反应结束后取10 μl反应产物，进行琼脂糖凝胶电泳检测。
注：举例仅供参考，实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况设定最佳反应条件。