流式核内染色试剂盒

DL-Nuclear Fix & Perm Kit

流式核内染色试剂盒

DL- Nuclear Fix/Perm Kit主要应用于对转录因子、核蛋白、细胞因子和趋化因子进行核内染色,可固定细胞并透化细胞核核膜,进而对核内蛋白质进行染色。Nuclear-Perm/Wash Buffer经过反复优化,可最大程度地减少非特异性染色并最大化特异性荧光信号强度。

规格: 1kit 50ml 
   

              产品号:

              # MD-20003


             
产品介绍:
DL- Nuclear Fix/Perm Kit主要应用于对转录因子、核蛋白、细胞因子和趋化因子进行核内染色,可固定细胞并透化细胞核核膜,进而对核内蛋白质进行染色。Nuclear-Perm/Wash Buffer经过反复优化,可最大程度地减少非特异性染色并最大化特异性荧光信号强度。

产品信息:
产品名称
Cat log #
规格
储存条件
流式核内染色试剂盒
MD-20003
1 kit
4oC
Fix/Perm Concentrate (2X)
MD-20003-FP
50ml
Fix/Perm Diluent
50ml
N-Perm/Wash Buffer (10X)
MD-20003-PW
50ml

试剂配制:
1.Fix/Perm工作液(1X):将1体积Fix/Perm Concentrate (2X)加入1体积的Fix/Perm Diluent,如将1ml Fix/Perm Concentrate (2X) 加入1ml的Fix/Perm Diluent,配制成2ml的Fix/Perm工作液,使用前新鲜配制。
2. N-Perm/Wash Buffer工作液(1X):将1体积N-Perm/Wash Buffer (10X)加入9体积的去离子水,如将1ml N-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去离子水,配制成10ml的1X N-Perm/Wash Buffer,1X N-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周内使用。

使用说明:

请详细阅读使用说明后再开始相关实验。

1.表面染色(可选):收集细胞后,每管加入50ul表面染色缓冲液和适量体积的表面抗体,充分重悬细胞,4℃,避光孵育30 min后,加入500 ul表面染色缓冲液,300g×5min,4℃离心,弃去上清液;

2.使用涡旋振荡仪震荡细胞沉淀,使其松散。

3.向每管细胞中加入500ul Fix/Perm工作液,充分重悬细胞,2-8°C避光孵育30分钟;  

        注:建议细胞密度不高于10^7/ml。

4.向每管细胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液;

5.600g×5 min离心,4℃,弃去上清液;

6.每管加入100ul 1X N-Perm/Wash Buffer工作液和适量体积的胞内抗体,充分重悬细胞;

7.2-8°C避光孵育1h以上或过夜;

8.向每管细胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液,洗去未结合抗体,600g×5 min离心,4℃,弃去上清液;

9.重复洗涤一次。

10.将细胞重悬于300-500ul N-Perm/Wash Buffer工作液进行上机分析。

      注:在室温下保存时,样品应在2小时内进行上机分析;在2-8°C下保存时,应在24小时内分析样品。