T细胞活化扩增培养试剂盒

Human T Cell Activation & Expansion Kit

人T细胞活化扩增培养试剂盒
人T细胞活化扩增培养试剂盒
T细胞活化扩增培养试剂盒

T细胞活化扩增培养试剂盒(Catalog # CS-20004-50)是为在体外活化和扩增人T细胞而专门设计的一款含血清培养基套装。

规格: 1kit 0.35ml 0.4ml 5ml 50ml 
   

              产品号:

              # CS-20004-50


             
产品介绍:
人T细胞活化扩增培养试剂盒(Catalog # CS-20004-50)是为在体外活化和扩增人T细胞而专门设计的一款含血清培养基套装。该培养试剂盒可高效活化人幼稚CD4+T或CD8+T细胞,并且达到高效扩增的目的,是研究人T细胞分化和功能的重要培养系统。
人T细胞活化扩增培养试剂盒包含50ml人T细胞基础培养基、0.35ml人T细胞活化补充因子、0.4ml人T细胞扩增补充因子和5ml 预筛选T细胞专用胎牛血清。基础培养基含有人T细胞生长的基础营养成分,不含T细胞活化、扩增所需的细胞因子。活化补充因子包含人T细胞活化所需的所有因子,扩增补充因子包含人T细胞扩增所需的所有细胞因子,使用时按照说明书所示比例加入至培养基中。

产品信息:
产品名称
Cat log #
规格
储存条件
人T细胞活化扩增培养试剂盒
CS-20004-50
1 kit
人T细胞基础培养基
CS-20004-B
50ml
4oC
人T细胞活化补充因子
CS-20004-ATS
0.35ml
4oC
人T细胞扩增补充因子
CS-20004-EXS
0.4ml
-20oC
预筛选T细胞专用胎牛血清
CS-TF-5
5ml
-20oC

其他本试剂盒未提供但需用的重要试剂和组分:
人T细胞磁珠分选试剂;

完全培养基配制:
在无菌生物安全柜中,开展以下操作:

1.在4度冰箱解冻补充因子和胎牛血清,混匀后使用。

      注:解冻后的补充因子和血清可放置于4oC冰箱,在1个月内使用;或者分装至合适体积后,保存于-20oC冰箱,不可反复冻融!

2.活化培养基配制:将1体积的活化补充因子和4体积的胎牛血清加入到35体积的基础培养基中,充分混匀,得到人T细胞活化培养基。如取100ul补充因子和400ul胎牛血清加入至3.5ml基础培养基,以此类推。

 扩增培养基配制:将1体积的成熟补充因子和10体积的胎牛血清加入到89体积的基础培养基中,充分混匀,得到人T细胞扩增培养基。如取100ul补充因子和1ml胎牛血清加入至8.9ml基础培养基,以此类推。

      注:配好的完全培养基请于4 oC保存,且于1个月内使用完毕。


使用说明:
人T细胞活化扩增培养试剂盒(点击下载)

请详细阅读使用说明后再开始相关实验。

1.使用磁珠分选人外周血单个核细胞中T细胞(参考所使用试剂盒的说明书),计数。

        注:健康供体每1ml外周血中约含有5-10*10^5 T细胞。

2.D0:使用活化培养基重悬T细胞,调整细胞密度至1*10^6/ml,按照如下表格所示将细胞铺于培养板:

培养板
完全培养基体积
T细胞数/孔
96孔板
0.2ml
0.2*10^6
24孔板
1.0ml
1.0*10^6

3.将培养板置于细胞培养箱,37oC,5%CO2,静置培养。

4.D2:补充1/4初始培养体积的新鲜活化培养基(参考步骤2表格)。

        注:完全培养基请恢复至室温后使用,减少对细胞的刺激;

5.D3:扩孔。

1)收集细胞,离心去除活化培养基,使用扩增培养基重悬,计数;

2)调整细胞密度至5*10^5/ml,按照如下表格将细胞铺于培养板,继续扩增培养T细胞:

培养板
完全培养基体积
T细胞数/孔
96孔板
0.2ml
1*10^5
24孔板
1.0ml
5*10^5    

6.D5/ D7:细胞计数,按照步骤5所示进行细胞扩增,或收集细胞进行后续操作和分析。

数据展示:


     
 图:人T细胞活化扩增培养鉴定。分选的人CD4+T细胞按照试剂盒说明活化后第三天,显微镜下观察克隆形成(A);
        分选的人CD4+T和CD8+T细胞按照试剂盒说明培养至图示天数,收集细胞计数计算扩增倍数(B)