人CD1c+cDC2树突状细胞培养试剂盒

Human CD1c+cDC2 Dendritic Cell Culture Kit

人CD1c+cDC2树突状细胞培养试剂盒
人CD1c+cDC2树突状细胞培养试剂盒
人CD1c+cDC2树突状细胞培养试剂盒

人CD1c+cDC2树突状细胞培养试剂盒(Catalog # CS-20003-100)是为在体外培养和诱导人单核细胞向成熟CD1c+cDC2树突状细胞(DC)亚群分化发育而专门设计的一款含血清培养基套装。

规格: 1kit 0.5ml 10ml 100ml 
   

              产品号:

              # CS-20003-100


             
产品介绍:
人CD1c+cDC2树突状细胞培养试剂盒(Catalog # CS-20003-100)是为在体外培养和诱导人单核细胞向成熟CD1c+cDC2树突状细胞(DC)亚群分化发育而专门设计的一款含血清培养基套装。该培养试剂盒可在7天内诱导人cDC2(CD11c+ HLA-DR+ CD1c+CD14-)亚群产生,是研究人cDC2分化发育和功能、以及产生人DC疫苗的重要培养系统。
人CD1c+cDC2树突状细胞培养试剂盒包含100ml人CD1c+cDC2树突状细胞基础培养基、0.5ml人CD1c+cDC2树突状细胞分化补充因子、0.5ml人CD1c+cDC2树突状细胞成熟补充因子和10ml预筛选树突状细胞专用胎牛血清。。基础培养基含有人树突状细胞生长的基础营养成分,不含树突状细胞分化、成熟所需的细胞因子。分化补充因子包含人单核细胞向CD1c+cDC2分化所需的所有细胞因子,成熟补充因子包含人CD1c+cDC2树突状细胞成熟所需的所有细胞因子,二者均以100X的储存液提供给用户。

产品信息:
产品名称
Catlog#
规格
储存条件
人CD1c+cDC2树突状细胞培养试剂盒
CS-20003-100
1 kit
人CD1c+cDC2树突状细胞基础培养基
CS-20003-B
100ml
4oC
人CD1c+cDC2树突状细胞分化补充因子
CS-20003-DES
0.5ml
-20oC
人CD1c+cDC2树突状细胞成熟补充因子
CS-20003-MTS
0.5ml
-20oC
预筛选树突状细胞专用胎牛血清
CS-DCF-10
10ml
-20oC

其他本试剂盒未提供但需用的重要试剂
人CD14+单核细胞磁珠分选试剂;

完全培养基配制
在无菌生物安全柜中,开展以下操作:
1.在4度冰箱解冻补充因子和胎牛血清,混匀后使用。
注:解冻后的补充因子和血清可放置于4 oC冰箱,在1个月内使用;或者分装至合适体积后,保存于-20oC冰箱,不可反复冻融!
2.分化培养基配制:将1体积的分化补充因子和10体积的血清加入到89体积的基础培养基中,充分混匀,得到人cDC2树突状细胞分化培养基。如取100ul补充因子和1ml血清加入至8.9ml基础培养基,以此类推。
 成熟培养基配制:将1体积的成熟补充因子和10体积的血清加入到89体积的基础培养基中,充分混匀,得到人cDC2树突状细胞成熟培养基。
注:配好的完全培养基请于4 oC保存,且于1个月内使用完毕。

使用说明:

请详细阅读使用说明后再开始相关实验。

1.使用磁珠分选人外周血单个核细胞中单核细胞(参考所使用试剂盒的说明书),计数。

      注:健康供体每1ml外周血中约含有1-3*10^5单核细胞。

2.D0:使用分化培养基重悬单核细胞,调整细胞密度至1*10^6/ml,按照如下表格所示将细胞铺于培养板:

培养板
完全培养基体积
单核细胞数/孔
24孔板
1.0ml
1.0*10^6
6孔板
4.0ml
4.0*10^6

3.将培养板置于细胞培养箱,37 oC,5%CO2,静置培养。

4.D3:半量换液。小心贴培养板侧壁用枪尖吸走1/2体积旧培养基,补充加入新鲜分化培养基至初始培养体积(步骤2表格)。

      注:完全培养基请恢复至室温后使用,减少对细胞的刺激;

5.D5:诱导成熟。小心贴培养板侧壁用枪尖吸走1/2体积旧培养基,补充加入新鲜成熟培养基至初始培养体积(步骤2表格)。

6.D7:轻轻吹打细胞,收集悬浮细胞,即为分化成熟的人CD1c+cDC2,可进行后续操作和分析。

        注:如需研究特定刺激对DC的影响,可提前加入相应刺激,待D7收集细胞进行分析。

 数据展示:


    
  图:人CD1c+cDC2树突状细胞培养鉴定。磁珠分选的人单核细胞按照上述说明培养,至第6天时,加入100ng/ml LPS刺激,第7天收集悬浮细胞进行流式染色分析。