PEGeasy病毒浓缩试剂
PEGeasy Virus Concentration Reagent
PEGeasy病毒浓缩试剂
PEGeasy病毒浓缩试剂(GE-19002-50)可简单、快速、高效地浓缩细胞培养上清中的重组慢病毒及逆转录病毒,无需超速离心。
规格: 50ml
产品号:
# GE-19002-50
产品介绍:
通过病毒包装生产出的病毒滴度通常较低,且含有较多杂质,通常无法满足后续储存和使用的需要,因此需要对病毒进行浓缩纯化。
PEGeasy病毒浓缩试剂(GE-19002-50)可简单、快速、高效地浓缩细胞培养上清中的重组慢病毒及逆转录病毒,无需超速离心。
50ml浓缩试剂可将200ml病毒上清浓缩至2ml或更小体积,满足实验室小规模病毒浓缩需要。
产品信息:
产品名称 | 内容 | 规格 | 储存条件 |
PEGeasy 病毒浓缩试剂 | 5XPEG 病毒浓缩试剂 | 50ml | 4℃ |
其他本试剂盒未提供但需用的重要试剂和组分:
基础培养基
使用说明:
请详细阅读使用说明后再开始相关实验。
1.按相关步骤包装生产慢病毒;
2.提前预冷离心机至4℃;收集病毒上清,2200g,4℃离心10min;
3.收集病毒上清至新离心管,加入病毒上清1/4体积的5XPEG Solution;
注:病毒上清在加入PEG Solution前推荐使用0.45μm滤器过滤。
4.轻轻上下颠倒1min混匀,4℃静置至少4h(推荐静置过夜);
5.提前预冷离心机至4℃;1600g,4℃离心1h;离心后管底可见白色沉淀;
注:逆转录病毒1400g,4℃离心45min。
6.小心去除上清,1400g,4℃离心1min去除残余上清;
7.重复第6步骤一次,以完全去除PEG上清;
8.沉淀用预冷的DMEM无血清培养基轻轻重悬,4℃静置3h(也可静置过夜以充分溶解沉淀);重悬体积根据浓缩倍数确定,推荐10-100倍浓缩;
9.轻轻重悬沉淀,分装,-80℃冻存备用。
注:分装之前可通过12000g,4℃离心10min去除不容物,进而提高病毒纯度,但会造成病毒滴度部分损失;重悬过程中应尽量避免气泡产生。